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武汉HEPES使用方法:
1、HEPES缓冲液可按需要的浓度立即添加到配置的培养液中,再过滤除菌。每1000ml培养液中添加2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH调pH至7.2,滤过除菌后应用,这时HEPES的应用浓度为10mmol/L。
2、也可以配出100x贮存液(lmol/L),应用前取99ml培养液添加lml贮存液,然后运用浓度仍为10mmol/L。lmol/L(100x)hepes缓冲液配置方式:取23.8gHEPES溶解90ml双蒸水中,用lNNaOH调pH至7.5一8.0,随后用水滴定剂至100ml,过滤除菌,散装瓶子(2ml/瓶),4℃或-20℃储存。
HEPES粉末耐高温,熔点高达200℃,因此不会因高压灭菌而降解。根据相关文献,如果将HEPES水溶液暴露于环境光下三小时,会产生细胞毒性的过氧化氢(H2O2)。
HEPES水溶液放置应注意:
1.HEPES水溶液需远离光线以免影响实验结果。而配置成溶剂后,要在4℃下保存,建议在短期内使用效果更佳。
2.HEPES粉末放置的时候一般放于干燥的室内,不能直接长时间照射阳光。