我们身边有很多无名英雄,看似平凡,实则默默的为我们贡献了很多。蛋白酶k就是分子诊断行业里的“无名英雄”,虽然和行业里的那些“高大上”们相比,蛋白酶K显得很低调,以至于我们长期忽视了它的重要性。随着这次新冠疫情的爆发,蛋白酶K的需求量暴增,国内外的供应量远跟不上消耗量,大家才突然意识到蛋白酶K是如此的重要。
蛋白酶K是一种丝氨酸蛋白酶,具有蛋白水解酶活性,并能在一系列广泛的环境(pH(4-12.5),高盐缓冲液,70℃的高温等)中保持活性。另外,蛋白酶K的活性不受SDS、尿素、EDTA、盐酸胍、异硫氰酸胍等,且一定含量的去垢剂还可以增强蛋白酶K的活性。在医疗(病毒与微生物消杀)、食品(肉类嫩化)、皮革(毛发软化)、酿酒(酒类澄清)、氨基酸制备(降解羽毛)、核酸提取、原位杂交等方面,蛋白酶K均有应用。而其中常用的应用是核酸提取。
包括那些与核酸紧密结合的组蛋白,从而使得核酸能从样品中释放,游离到提取液中,便于下一步的抽提和纯化。在病毒核酸检测中,蛋白酶K是病毒采样液中的重要组分之一,蛋白酶K可以裂解病毒的外壳蛋白并使其失活,这样在运输和检测阶段更有保障;另外,蛋白酶K还可以降解RNA酶,防止病毒RNA的降解,有利于核酸检测。